游戏内共有“马力欧”、“路易吉”、“奇诺比奥”、“奇诺比珂”这4名角色供玩家选择，除了外表不同外，他们的能力一样，并没有什么区别。在“故事模式”中，玩家主要以马力欧的身份进行游玩。而在“游玩模式”中，玩家能从上述4名角色中自由选择自己喜欢的来游玩。而当玩家在线上模式中与其他玩家一起对战时，系统会随机选择某位角色分配给玩家。
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